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德系西门塔尔（弗莱维赫）肉牛连续超排技术应用实例分析

文章来源：
作者：体系办公室
发布时间：13-10-2010 10:46:48
浏览次数：2114
一、供体牛的选择与饲养管理
1、供体牛的选择 供体牛须生产性能好，遗传性稳定、谱系清楚，体质健壮、繁殖机能正常，无遗传和传染性疾病。本次所选择的供体牛是20月龄的青年弗莱维赫肉牛。
2、供体牛的饲养管理 保持供体牛群饲养环境卫生、干燥、棚舍内温度适宜。保持饲养环境稳定，避免应激。制定合理的供体牛日粮配方，保证正常的营养状况和营养平衡。满足供体牛清洁的饮水需要。育成牛做供体时，一般在超排冲胚前3个月加强饲养，平时日增重为0.30～0.4kｇ/日，使超排时总增重达个体体重的5%以上。
二、供体牛的超数排卵及人工授精
1、超数排卵
（1）在超排前3周，即放置孕酮阴道栓时给供体牛肌肉注射VA、VD、亚硒酸钠VE针剂，注射剂量参考针剂说明。
（2）用于超数排卵的激素 FSH（垂体促滤泡素）：中国科学院动物研究所生产，10mg/瓶；LH（垂体促黄体生成素）：宁波激素制品厂生产，200IU/瓶；PG（氯前列烯醇）：上海市计划生育科学研究所生产，0.2mg/2m/瓶L
（3）超数排卵方法 以母牛放CIDR之日作为0天，在第6-9天，每天早（7：00—8：00）和晚（18：00—19：00）注射2次FSH，连续4天，递减注射，（表1）。


 
（4）供体牛发情鉴定：在第7次注射FSH之后，对超排供体牛，每隔6小时观察一次发情情况，每次半小时以上。以母牛站立接受其它牛爬跨做为发情的标准。超排母牛在发情后第7天用非手术法采集胚胎。


2、人工授精 选择优秀种种公牛的精液，输精次数不少于2次（表2）。
三、牛非手术冲卵技术及胚胎质量鉴定
1、非手术法冲胚 超排后的供体牛在发情后第7.0～7.5天用非手术法采集胚胎。此时胚胎处于以下发育期：紧缩桑椹胚（M）、早期囊胚（EB）、囊胚（B）、扩张囊胚（EXB）。用形态学方法进行胚胎质量鉴定，将胚胎依次分为1、2、3、4四级，1、2级为可用胚胎（表3）。 
 
 
1、胚胎的冷冻保存将1、2级胚胎用于冷冻。冷冻前将胚胎在保存液中冲洗10次，然后直接放入冷冻液，并将胚胎装入细管：用AG冷冻液/保存液→装管，5分钟→冷冻仪（-6℃）→在-6℃平衡5分钟→植冰（7～10秒）→继续平衡5分钟→以0.4～0.6℃/分的速度下降→-35℃→平衡5分钟→投入液氮。
2、胚胎的解冻 胚胎→32℃水浴10秒→拭干细管→用70%酒精棉球擦拭细管，晾干→剪去细管塞把胚胎推入HOLDING液，洗3遍→把胚胎装入细管→把细管装入移植枪→移植
五、受体牛的选择及饲养管理
1、受体牛的选择
（1）拥有正常的发情周期，无繁殖机能疾病。
（2）年龄在3-6岁之间，经产牛分娩在90天以上，产犊性能和哺乳能力良好，无流产史。
2、受体牛的饲养管理
（1）受体牛在移植前6～8周开始补饲，保持日增重0.30～0.40kg/日。在移植前6～8周，注射VA、VD、亚硒酸钠VE针剂，补充微量元素，如硒、锌等。
（2）受体牛单独组群饲养，保持环境相对稳定，避免应激反应。
六、牛胚胎非手术移植技术
1、受体牛的同期化发情处理
（1）同期化发情处理方法：同期化处理之前对受体牛进行直肠触摸，检查卵巢是否处于活动状态。处于活动状态的牛方可进行同期化发情处理。药品：CIDR：新西兰INTERVET公司产品。
氯前列烯醇（PG）：0.2mg/2mL/支。育成牛0.2～0.4mg/次。
方法：放CIDR：如移植鲜胚胎须与供体同一天放栓，如移植冻胚则可在任意时间放栓。注射PG：在放CIDR后第8天。


 
 


 
取出CIDR：在注射PG后的第3天。取出CIDR后24～48小时观察发情。受体牛发情之日计为0天，6～8天内进行胚胎移植。
（2）鲜胚移植时受体牛的同期化发情处理时间安排（表4）。
2、受体牛的发情鉴定应对受体牛跟群观察，以受体牛稳定站立接受其它牛爬跨为发情标准。并准确记录开始站立接受爬跨的时间（以小时为单位记录）。
3、受体牛胚胎移植技术受体牛移植操作步骤：受体牛在发情后6～8天之间均可进行移植（发情之时定为0小时）。移植前对受体牛进行直肠触摸，检查黄体是否合格。合格者用于移植。对受体牛实行1～2尾椎间硬膜外麻醉，擦拭外阴部。对照供体牛采胚记录表和合格受体的发情记录，合理地搭配受体和胚胎。将解冻好的胚胎或鲜胚装入0.25mL塑料细管（直接解冻移植法不需要重新装管），装入移植枪。将胚胎移植到受体有黄体一侧子宫角的上1/3—1/2处（图1-4）。
七、妊娠的受体牛的饲养管理
1、在移植后70～90天对受体牛进行妊娠检查，对已妊娠的受体要加强饲养管理，避免应激反应。
2、妊娠受体在产前3个月要补充足量的维生素、微量元素，适当限制能量摄入，既要保证胎儿的正常发育，又要避免难产。
3、根据当地的疾病发生情况，有目的地注射一些疫苗，以防胎儿流产或传染病发生。
八、应用举例
团队成员2009年5 -10月共为张家口市张北华田牧业科技有限公司的13头弗莱维赫肉牛连续4次超排冲胚，每次获得头均可用胚胎数均在7枚以上，达到了理想的胚胎生产目的（表5）。
九、结果分析
根据经验总结如下：
1、牛超排生产胚胎最好选择在春秋两季。
2、超排处理时间最好选择晴朗，凉爽干燥的天气。
3、超排间隔以1个月以上为宜，连续超排4次效果不受影响。
图表见附件。
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